伯樂新型雙色實時熒光定量PCR儀CFX Duet隆重上市

      2022年5月25日，美國伯樂公司（Bio-Rad Laboratories）正式發布了CFX Duet Real-Time PCR System。

      CFX Duet系統配置有藍450-490nm、綠515-535 nm兩種LED熒光激發光源和綠515-530 nm（適用于FAM、SYBR Green I）、黃560-580 nm（適用于VIC,  HEX, CAL Fluor Gold 540, Cal Fluor Orange）兩個熒光信號檢測器，可在單一反應孔內連續采集2種PCR模板的熒光信號，實現一個反應同時測定2種靶標（target），如基因分型中野生型與突變型片段、多基因表達分析中的2種擴增序列等等。
       除可用于常規熒光染料、TaqMan一類水解熒光探針信號檢測，CFX Duet還融合羅氏LightCycle雙雜交探針（HybProbe Probes）專用檢測通路，從而具備了TaqMan、LightCycle FRET探針兩種分析應用能力。
由于它有這兩方面的雙重檢測功能，又是伯樂CFX家族的新成員，故借用音樂二重奏（Duet）的概念，命名為CFX Duet。

Bio-Rad CFX Duet 、CFX Opus 96和CFX Connect技術性能的對比

型號	CFX Opus 96	CFX Duet	CFX Connect
儀器外形
操作控制方式	觸摸屏控制 云平臺遠程控制 電腦聯機控制	電腦聯機控制
聯機數據分析軟件	CFX Maestro Software
檢測通道配置	5熒光通道+1 FRET	2熒光通道+1 FRET
熒光信號測讀方式	光梭移動至反應孔正上方逐孔采集熒光信號
檢測靈敏度	單拷貝人基因組基因
檢測動態范圍	10數量級
熱蓋開蓋方式
	抽屜式	抽屜式	鉸鏈式
PCR樣品通量	96×0.2mL （Low profile）
PCR升溫速率	最快5℃/sec，平均3.3℃/sec
PCR控溫精度	±0.2℃（target at 90℃）
PCR溫度均一性	±0.4℃（10秒內達到90℃
退火溫度梯度	1 ～ 24℃范圍可任意設定

      CFX Duet 、CFX Opus 96和CFX Connect三款實時熒光定量PCR儀，PCR反應模塊和熒光信號檢測模式都相同，差異主要有三個方面。

1、熱蓋的啟閉操作

將測試樣品加載到PCR反應模塊中或運行結束移走樣品，首先需開啟熱蓋。

CFX Connect熱蓋為半自動翻蓋式設計，開蓋需執行三個必須動作：

      首先在 CFX Maestro 軟件“檢測到的儀器”界面點擊“Open Lid”；

      隨后在軟件“Start Run”選項卡上，單擊“Open Lid”；

      最后是手動按下儀器正面開蓋按鈕。

而關閉熱蓋的操作順序為：

      手工按下儀器上的熱蓋開蓋按鈕；

      在軟件的“檢測到的儀器” 界面點擊“Close Lid”；

      在軟件“Start Run”選項卡上單擊“Close Lid”。

概括起來就是：系統執行關閉熒光模塊、自動翻蓋/關閉熱蓋之外，操作者手工完成熱蓋的機械解鎖/鎖定操作。

      而CFX Duet、CFX Opus 96的PCR熱蓋的啟閉為水平伸縮滑動，主機上沒有手動開啟/關閉熱蓋按鈕。啟閉的熱蓋，通過Home(主屏幕) 、Run Setup( 運行設置) 或Run Status( 運行狀態) 上按鈕的點擊Open/Close Lid，自動完成打開或關閉熱蓋。

      上樣時，打開電動熱蓋的操作是：在Home界面點擊Open Lid → 在Run Setup界面點擊Open Lid即可。

      而關閉電動熱蓋的操作是：在Home界面點擊Close Lid →在Run Setup界面點擊Close Lid。

      與CFX Connect比，CFX Duet熱蓋操作自動化，更易于與機械臂整合，構建自動化檢測平臺。

2、儀器的操作控制

      CFX Duet 與CFX Connect須與本地電腦聯機，通過CFX Maestro Software控制系統儀器運行和實驗數據管理，均無法接入伯樂BR.io云平臺。而CFX Opus 96不僅可以通過自帶觸摸屏控制單元獨立運行，還可登錄BR.io云端實現數據管理、分享和儀器的遠程運行控制。

3、多重實時PCR功能

      CFX Duet 、CFX Connect均為雙色熒光檢測通路，而CFX Opus 96為5色熒光通道。在基于熒光探針qPCR應用中，CFX Duet只能檢測2種熒光信號，可完成SNP基因分型及單孔內1個內參+1種模板的雙重熒光定量分析（Duplex qPCR）。而CFX Opus 96則可勝任三重、四重這類多色熒光定量檢測任務，這對于臨床醫學、流行病學中呼吸道、消化道感染性疾病復雜病原菌的快速鑒別極為有利。

       須說明，CFX Duet在多重定量分析的局限性只存在于熒光探針應用。若采用evaGreen、LC Green飽和熒光染料的高分辨率熔解曲線技術路線，CFX Duet完成多重定量分析的能力與多熒光通道機型間并無區別。

      CFX Duet反應模塊最大變溫速率高達5.0℃/秒，這在同檔次進口品牌qPCR儀中已遙遙領先。

      至于CFX Duet實時熒光定量PCR儀的應用潛力，基于《美人首飾侯王印盡是沙中浪底來——牛人用伯樂CFX connect實時熒光定量PCR儀都干了啥？》的調研結論，我們深信：CFX Duet此番榮耀登場，也必將技驚四座，贏得滿堂喝彩！